【Abstract】
The present study was succeeded in culturing 16 species from 3 genuses of Chu-Soh, namely,Cordyceps, Ophiocordyceps, and Isaria, and screened their metabolites for antiproliferative activities against human cancer cells. Culture filtrates (metabolite-containing media) of 13 species from Chu-Soh were lyophilized and resuspended in phosphate buffer to investigate their in vitro antiproliferative activities against 5 human cancer cell lines. Six species, including Cordyceps formicarum, out of 13 species had very little effect when tested at low concentrations. However, 3 species, including Cordyceps militaris, out of 13 species significantly inhibited cell proliferation in almost all the cancer cell lines tested. Culture filtrates from C. roseostromata showed very strong antiproliferative activities against leukemia cells (U937) and breast cancer cells (MCF7), but not in normal human dermal fibroblasts. Cordyceps ophigoglossoides, Ophiocordyceps pulvinata sp. nov., and Isaria sp. nov. (Konaabutake), effectively and specifically inhibited cell proliferation in breast cancer cells (MCF7), leukemia cells (U937), and gastric cancer cells (KatoIII). The antiproliferative metabolites obtained from these 4 species were highly specific to human cancer cell lines. These findings suggest that the unknown compounds in the metabolite-containing media from cultures of these mushrooms are potential lead compounds for developing anticancer drugs with extremely mild side effects.

日本語訳【要旨】
今回の研究で、我々は16種の日本に生息する冬虫夏草属＝虫草Cordyceps、Ophiocordyceps、Isaria属の人工培養に成功し、その培養代謝物の、数種のヒト癌細胞に対する抗増殖抑制活性に関してスクリーニングした。人工培養した13種の虫草Chu-Sohの培養濾液（活性代謝液）を凍結乾燥後、リン酸緩衝液に溶かして、in vitroにおけるヒト癌細胞5種に対する抗増殖抑制効果について検討した。

13種のうち、マルミノアリタケの培養濾液をはじめとする6種は、正常細胞（ヒト皮膚繊維芽細胞（NHDF））に影響を及ぼさない低濃度ではほとんど効果は認められなかった。一方、サナギタケ培養濾液をはじめとする3種は、ほとんど全ての癌細胞の増殖を有意に抑制した。

ベニイロクチキムシタケの培養濾液は、白血病細胞（U937）及び乳癌細胞（MCF7）に対して極めて強い増殖抑制活性を示したが、ヒト皮膚繊維芽細胞（正常細胞）（NHDF）への影響は認められなかった。

ハナヤスリタケ、コブガタアリタケ及びコナアブタケ培養濾液は、低い濃度範囲において乳癌細胞（MCF7）、白血病細胞（U937）及び胃癌細胞（KatoIII）に対して効果的かつ特異的に増殖抑制効果を示した。これら４種の冬虫夏草が持つヒト癌細胞増殖抑制効果は、細胞の種類によって感受性が大きく異なる。

この事実は、これらのキノコの代謝液に含まれる未知化合物が、副作用が極めて穏やかな抗癌剤開発に役立つリード化合物と成り得ることを示唆している。

この論文は、我々の計画に従って行われている新しい研究の最初の報告である。ベニイロクチキムシタケの培養濾液の細胞増殖抑制効果は、癌細胞に対して効果が認められる濃度範囲において、正常なヒト皮膚繊維芽細胞に対する増殖抑制が殆ど認められない。付け加えて、我々はマウスに対する急性毒性および慢性毒性に関する予備的な実験を実施したところ、対照群と被験群の体重増加に大きな差異は認められず、被験群の摘出臓器についても異常は全く認めらなかった（data not shown、次回の論文にて公表）。

以上の知見から、ベニイロクチキムシタケの代謝液に含まれる何らかの成分が、副作用が極めて少ない抗癌剤の開発に貢献できる新規リード化合物と成り得るものと期待できる。現在、我々はベニイロクチキムシタケ代謝液中の活性本態を低分子化合物に絞り、各種有機溶媒によって分画後、活性画分を高速液体クロマトグラフィーによって単離精製することを進め、その化学構造の決定をNMR法等による機器分析を中心に進めている。一方、クロマトグラフィーにより精製した活性画分の抗癌活性機序を解明するための実験とマウスに対する毒性試験を正確に行い、次回の論文においてその詳細を公表する予定である。

さらに、その他のChu-Soh 3種〔ハナヤスリタケ、コブガタアリタケ及びコナアブタケ培養濾液〕も、正常細胞に影響しない低い濃度範囲において細胞特異的に癌細胞の増殖を抑制する。従って、我々はこれらの菌からもコルジセピンやエルゴステロールパーオキサイド以外の新たな抗がん剤のリード化合物が発見できる可能性が高いものと期待し、近い将来、これらの研究を始めるつもりである。